諾華CAR-T療法做不到的，這些免疫細(xì)胞療法新物種竟然做到了

提起免疫細(xì)胞療法，大家首先想到的肯定就是諾華的Kymriah和凱特的Yescarta。這是目前全球僅有的兩款經(jīng)監(jiān)管機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)上市的CAR-T療法。這兩款CAR-T療法均為自體CAR-T，只能治療血液腫瘤，它們拿實(shí)體瘤無(wú)招。那么，實(shí)體瘤患者是否只能望免疫細(xì)胞療法而興嘆了呢？且慢，讓萬(wàn)海君慢慢向你道來(lái)。近年來(lái)，免疫細(xì)胞療法產(chǎn)生了一些“新物種”，它們終于代表免疫細(xì)胞療法向?qū)嶓w瘤集中火力開(kāi)火，而且費(fèi)用更低，有的可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)貨供應(yīng)，讓更多癌癥患者有了更多選擇，更有了更多新生希望！這些“新物種”都有哪些呢？ 

CAR-NK療法

今年6月28日，期刊《細(xì)胞·干細(xì)胞》（CellStem Cell）發(fā)表了一項(xiàng)新研究，來(lái)自于加州大學(xué)圣地亞哥分校醫(yī)學(xué)院和明尼蘇達(dá)大學(xué)的研究人員報(bào)告稱(chēng)：經(jīng)過(guò)CAR修飾的衍生自人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPSC)的自然殺傷(NK)細(xì)胞(NK-CAR-iPSC-NK cells)，同CAR-T免疫療法所發(fā)揮的抗癌作用類(lèi)似，在小鼠卵巢癌模型中表現(xiàn)出了增強(qiáng)的抗腫瘤活性。

在這項(xiàng)研究中，小組人員在卵巢癌異種移植小鼠模型中測(cè)試了源自人類(lèi)iPSC的CAR NK細(xì)胞，并比較了它們與其他版本的NK細(xì)胞以及CAR-T細(xì)胞的抗腫瘤活性。結(jié)果表明：iPSC來(lái)源的CAR-NK細(xì)胞表現(xiàn)出與CAR-T細(xì)胞相似的活性，但毒性較低。對(duì)此，該論文通訊作者、加州大學(xué)圣地亞哥分校細(xì)胞治療部門(mén)負(fù)責(zé)人Dan S. Kaufman博士表示，數(shù)據(jù)顯示卵巢癌是一個(gè)很好的第一目標(biāo)，但包括乳腺癌、腦腫瘤和結(jié)腸癌等在內(nèi)的實(shí)體瘤，以及白血病等血液腫瘤也可能是潛在的治療對(duì)象。

Kaufman博士解釋說(shuō)：“免疫治療的主要挑戰(zhàn)之一是改良細(xì)胞的臨床培育。我們已經(jīng)證明，可以改造iPSC，分化出表達(dá)有嵌合抗原受體（CAR）的NK細(xì)胞，從而更好地對(duì)抗難以治療的癌癥。”研究人員表示，這些發(fā)現(xiàn)非常重要，因?yàn)?/span>NK細(xì)胞可能比T細(xì)胞具有更明顯的優(yōu)勢(shì)，包括能夠以現(xiàn)貨(off the shelf)的方式提供安全性更高工程化的NK細(xì)胞，而無(wú)需進(jìn)行患者匹配。具體來(lái)說(shuō)，CAR-NK療法具有哪些優(yōu)勢(shì)呢？ 

1、CAR-NK療法對(duì)實(shí)體瘤和血液腫瘤通殺

除了血液腫瘤之外， CAR-NK療法同樣在實(shí)體瘤研究中取得顯著效果。NK細(xì)胞表面活化受體NKG2D的配體在大多數(shù)惡性腫瘤細(xì)胞中表達(dá)，因此，利用NK細(xì)胞表面NKG2D的胞外區(qū)直接與CD3ζ結(jié)合，同時(shí)以DAP10作為第二信號(hào)分子，更大程度地增強(qiáng)NKG2D的表達(dá)，放大下游的活化信號(hào)，這樣的設(shè)計(jì)在急性淋巴細(xì)胞白血病、前列腺癌和橫紋肌肉瘤等多種惡性腫瘤細(xì)胞系中殺傷效果明顯。

2、CAR-NK細(xì)胞可規(guī)模化生產(chǎn)

目前所用的CAR-T細(xì)胞，其制備需要從患者自身抽取血液分離T細(xì)胞進(jìn)行改造，而晚期腫瘤患者自身免疫細(xì)胞弱化，分離出的細(xì)胞狀態(tài)較差，增值速度較慢，在培養(yǎng)的過(guò)程中可能出現(xiàn)細(xì)胞死亡的情況。正常的培養(yǎng)周期是30天，這對(duì)于癌癥患者無(wú)疑是非常漫長(zhǎng)的過(guò)程。而CAR-NK細(xì)胞，是由穩(wěn)定的細(xì)胞株改造而來(lái)，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定，質(zhì)量均一，從而解決了從病人抽血、個(gè)性化制備的局限，可以大規(guī)模生產(chǎn)，增強(qiáng)了治療的通用性和簡(jiǎn)易性，有望改變傳統(tǒng)免疫治療繁雜的模式，使其成為藥品一樣現(xiàn)成的易得治療方式，實(shí)現(xiàn)現(xiàn)貨(off the shelf) 供應(yīng)。

3、CAR-NK療法可激發(fā)患者體內(nèi)長(zhǎng)效繼發(fā)免疫

CAR-NK療法可以及時(shí)、大規(guī)模殺傷腫瘤細(xì)胞，并使凋亡的腫瘤細(xì)胞大量釋放多種腫瘤抗原(neoantigens)，從而激活樹(shù)突狀抗原遞呈細(xì)胞、殺傷T細(xì)胞和T記憶細(xì)胞。因此CAR-NK療法不僅起到短期大量殺傷腫瘤的作用，還有長(zhǎng)效激發(fā)免疫的作用。

4、CAR-NK療法治療費(fèi)用相對(duì)較低

美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市的兩款CAR-T療法，諾華Kymriah定價(jià)47.5萬(wàn)美元，凱特Yescarta定價(jià)37.3萬(wàn)美元，按今日（2018年7月24日）匯率計(jì)算，折合人民幣分別為3235510 元、2540726.8元，動(dòng)輒兩三百萬(wàn)元，如此昂貴的治療費(fèi)用，堪稱(chēng)奢侈品了，平民百姓根本用不起。而CAR-NK細(xì)胞可以大規(guī)模培養(yǎng)，縮減了治療成本，使之真正成為一項(xiàng)普通人也能享受的“平價(jià)”免疫細(xì)胞治療技術(shù)。

CAR-巨噬細(xì)胞免疫療法

今年6月27日，一家專(zhuān)注于開(kāi)發(fā)細(xì)胞免疫治療藥物的公司——Carisma Therapeutics宣布完成了5300萬(wàn)美元的A輪融資，以推進(jìn)其獨(dú)特的CAR-巨噬細(xì)胞免疫(CAR-MA)療法技術(shù)平臺(tái)的發(fā)展，并將一些成熟項(xiàng)目推向臨床。值得注意的是，這家公司的技術(shù)特點(diǎn)是將CAR與巨噬細(xì)胞相結(jié)合，而不是T細(xì)胞相聯(lián)合，因此被認(rèn)為有望成為變革性的腫瘤免疫療法。 

Carisma開(kāi)創(chuàng)了CAR-巨噬細(xì)胞免疫療法平臺(tái)，以進(jìn)行藥物的發(fā)現(xiàn)與開(kāi)發(fā)。該方法首次將抗原識(shí)別與巨噬細(xì)胞的效應(yīng)功能相結(jié)合的技術(shù)。這樣的雙重作用機(jī)制不僅可以直接殺死靶細(xì)胞，還可以利用抗原呈遞細(xì)胞的生物學(xué)特性來(lái)獲得適應(yīng)性免疫應(yīng)答的能力。

這種技術(shù)將CAR與巨噬細(xì)胞而不是T細(xì)胞聯(lián)合，以創(chuàng)造比CAR-T更好地用于治療實(shí)體瘤的方法。因?yàn)樾揎椀?/span>T細(xì)胞很難進(jìn)入實(shí)體瘤而在免疫抑制性的微環(huán)境中存活，使得其效果比在血液癌中的效力更弱。而巨噬細(xì)胞比T細(xì)胞的優(yōu)勢(shì)在于，他們?cè)谀[瘤微環(huán)境中能夠更好地爭(zhēng)奪氧氣和營(yíng)養(yǎng)，使其成為這些區(qū)域中的優(yōu)勢(shì)免疫細(xì)胞，有望成為治療實(shí)體惡性腫瘤的可能候選者。

基于這個(gè)想法，Carisma希望從癌癥患者身上攝取巨噬細(xì)胞，并對(duì)其進(jìn)行修飾使其表達(dá)能夠識(shí)別腫瘤抗原的CAR，再進(jìn)入患者本人的體內(nèi)，修飾后的巨噬細(xì)胞就會(huì)滲入實(shí)體瘤并吞噬癌細(xì)胞。同時(shí)，巨噬細(xì)胞也會(huì)將腫瘤抗原片段呈遞給T細(xì)胞以引發(fā)免疫反應(yīng)。

基于這種機(jī)制，該平臺(tái)的候選藥物最早申請(qǐng)用于治療實(shí)體瘤，其他潛在的應(yīng)用還包括在多發(fā)性疾病狀態(tài)下的蛋白質(zhì)聚合體破壞。該公司預(yù)計(jì)將于2019年將首款候選藥物推向臨床。

TCR-T療法

TCR-T療法同CAR-T療法一樣，也是通過(guò)基因改造的手段提高T細(xì)胞受體對(duì)特異性癌癥細(xì)胞抗原的識(shí)別能力和進(jìn)攻能力，TCR-T的原理是將患者的腫瘤浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞（TILs）中，可通過(guò)限制性抗原識(shí)別殺傷腫瘤的T細(xì)胞提取，利用基因克隆技術(shù)獲取其T細(xì)胞受體（TCR）序列，再利用載體將該段基因轉(zhuǎn)染至更多的T細(xì)胞上，使識(shí)別該抗原的T 細(xì)胞上萬(wàn)倍的增長(zhǎng)。TCR-T來(lái)自于TCR，因此可識(shí)別來(lái)源于細(xì)胞核、胞漿、胞膜的各種抗原。 

自體CAR-T療法目前只能治療血液腫瘤，而TCR-T療法主要是針對(duì)實(shí)體瘤。例如，在凱特的在研TCR-T療法，靶向的是MAGE A3抗原。這種癌癥抗原在膀胱癌、食管癌、宮頸癌、頭頸癌、肺癌、卵巢癌、以及其他癌癥中普遍存在。按設(shè)想，這款療法有望能對(duì)多種實(shí)體瘤進(jìn)行治療。

在凱特這款在研TCR-T療法的一項(xiàng)劑量遞增研究中，17名患有轉(zhuǎn)移性實(shí)體瘤的患者在化療后，接受了MHC II類(lèi)限定，針對(duì)MAGE A3的TCR-T療法。其中，4名患者出現(xiàn)了緩解，1名轉(zhuǎn)移性宮頸癌患者出現(xiàn)了完全緩解，并持續(xù)了29個(gè)月。此外，3名患者出現(xiàn)了腫瘤尺寸的縮小，他們體內(nèi)的TCR-T細(xì)胞水平在治療的一個(gè)月后也有顯著上升。這3名患者里，一名患有尿路上皮癌的患者在治療后的第19個(gè)月時(shí)還處于部分緩解中。該研究中沒(méi)有出現(xiàn)預(yù)料外的脫靶毒性，也沒(méi)有出現(xiàn)和治療相關(guān)的死亡事件。

通用型CAR-T療法

通用型CAR-T療法就是異體CAR-T療法。顧名思義，這種療法有別于諾華Kymriah和凱特Yescarta的自體CAR-T療法，它的T細(xì)胞來(lái)源于健康供者，不像自體CAR-T療法需要從患者血液中提取T細(xì)胞，保證了T細(xì)胞質(zhì)量。萬(wàn)海的在研產(chǎn)品第五代CAR-T療法就屬于異體（通用型）CAR-T療法。萬(wàn)海通用型CAR-T療法由于能規(guī)模化制備細(xì)胞，可現(xiàn)貨供應(yīng)，不僅大大降低了費(fèi)用，還縮短了患者等待的時(shí)間，而且這種療法增加了安全開(kāi)關(guān)，大大降低了自體CAR-T療法常見(jiàn)的細(xì)胞因子風(fēng)暴的風(fēng)險(xiǎn)。 

萬(wàn)海的通用型CAR-T療法具有以下七大優(yōu)勢(shì)：

（1）采用基因編輯技術(shù)敲除T細(xì)胞表面的TCR，消除GvHD排異反應(yīng)。

（2）敲除HLA-I基因，延長(zhǎng)CAR-T細(xì)胞在體內(nèi)的存活時(shí)間，降低復(fù)發(fā)率。

（3）人源化scFv（胞外的抗原結(jié)合域）序列，降低人抗鼠抗體反應(yīng)（HAMA）。

（4）提供安全開(kāi)關(guān)，解決治療安全風(fēng)險(xiǎn)。

（5）提高T細(xì)胞殺傷力，療效更顯著。

（6）規(guī)模標(biāo)準(zhǔn)化制備，降低90%成本，費(fèi)用相對(duì)較低。

（7）通用化，適用人群廣泛，周期短，能產(chǎn)業(yè)化推廣應(yīng)用。

上面這些免疫細(xì)胞療法“新物種”，不再局限于血液腫瘤，擴(kuò)大了適應(yīng)癥，而且費(fèi)用更低，讓普通患者都能用得起。期待這些免疫細(xì)胞療法早日應(yīng)用于臨床，讓更多的癌癥患者受益。